Duda elispot

Hola!! tengo una duda respecto a la técnica del ELISPOT. Según he leído, esta técnica consiste en: 1)pegar los anticuerpos específicos para un citocina en el fondo del pocillo 2)se depositan las células productoras de citocinas 3)se añade un segundo anticuerpo específico de la citocina marcado con un enzima que permite el revelado de la prueba por medio de la adición de un substrato. La finalidad es determinar si las células añadidas son productoras de las citocinas o no. bueno mi pregunta es: para qué se añade un segundo anticuerpo con un enzima? Si las supuestas células productoras de la citocina no lo fueran, y se añadiese un anticuerpo con enzima, al añadir el sustrato, el enzima haría reacción igual y el sustrato cambiaría igualmente de color, no? Lo único que se me ocurre es que la unión citocina-anticuerpo favorezca la reacción enzimática, pero esto es solo una suposición, ya que de momento no lo he leído en ningún sitio. Espero que alguien haya leído hasta aquí y pueda ayudarme. Gracias. Luis
.